专利简介：Ⅰ亚群禽腺病毒（Fowl adenovirus group I，FAdV-I）作为禽类养殖业中重要的病原体，其流行病学特征复杂且防控难度大。该病毒包含12种血清型，分为A-E五个种群，既可垂直传播又能水平扩散，更棘手的是能在鸡群中形成潜伏感染。当与其他病原体共感染时，FAdV-I作为继发病毒会显著加重病情，导致包涵体肝炎、心包积液综合征等疾病，近年来在我国多省流行造成严重经济损失。现有检测技术各存明显局限：病毒分离鉴定需专业实验室条件且耗时过长；PCR技术虽灵敏度较高，但操作繁琐且需专用设备；ELISA方法简便却灵敏度不足，对低病毒载量的潜伏感染样本易出现假阴性；AGP法则完全无法检测潜伏感染。这些技术瓶颈使得开发快速、灵敏、特异的现场检测方法成为行业迫切需求。

        本发明开发了基于多壁碳纳米管-壳聚糖-铂/银（MWCNT-Chi-Pt/Ag）纳米复合物的电化学免疫传感器。该技术的核心突破体现在三个层面：首先，通过优化MWCNT : Ag : Pt=30 : 1 : 2的质量比，创新制备双金属纳米复合物，其中先加K2PtCl4搅拌3小时、后加AgNO3搅拌2小时再一步还原的工艺，确保了双金属纳米粒子的均匀负载；其次，采用双抗体夹心法设计，工作电极以玻碳电极为基底，经MWCNT-Chi修饰后固定FAdV-I单克隆抗体，而MWCNT-Chi-Pt/Ag纳米复合物则作为信号标记物与多克隆抗体结合，巧妙结合了单抗的高特异性和多抗的广谱识别优势；最后，通过系统优化确立最佳检测条件：待测样品孵育30分钟、信号标记物孵育40分钟，测试底液为pH 7.4的PBS缓冲液，H2O2浓度5 mM，使整个检测流程缩短至70分钟。这种设计不仅解决了多血清型病毒检测的通用性问题，更通过纳米材料的信号放大效应显著提升了检测灵敏度。

       与传统方法相比，本发明展现出显著优势：检测限达100.67 EID50/mL，灵敏度较PCR提高10倍以上；能广谱检测12种血清型，与常见禽病原体无交叉反应；批内批间变异系数<5%，100份临床样本验证与测序结果符合率100%。该技术突破了传统方法在灵敏度、通用性和操作便捷性方面的局限，特别适合养殖场现场快速检测。未来可进一步开发便携式设备，为禽腺病毒防控提供技术支撑，并为其他动物疫病检测提供新范式，具有重要的推广应用价值。